미생물학 Chapter 29 [Mycobacterium tuberculosis] 결핵균

1. 결핵균 (Mycobacterium tuberculosis) [법정감염병 2급] ★★★

 사람에게 결핵을 일으키며 가장 많은 것은 폐결핵이다. 감염원은 결핵에 감염된 환자이며, 비말감염, 먼지감염에 의해 호흡기계를 통해 감염된다. 폐에 초기감염 병소가 생기면 대부분의 사람은 면역이 되어 치유된다. 이때 tuberculin 반응은 양성이 된다. [잠복결핵]

 면역력이 약한 사람은 더욱 진전되어 폐결핵증이 된다. 또 결핵병소가 기관지와 연결되면 내용물이 외부로 객출되어 폐에 공동이 생긴다. 객출물에는 많은 결핵균이 함유되어 있어, 이것이 다른 사람에게 감염된다. 폐결핵 외에 결핵성 흉막염, 결핵성 늑막염, 결핵성 수막염, 장결핵, 신장결핵, 관절결핵, 어린 아동의 림프선 결핵 등을 일으킨다.

 폐결핵인 경우 주증상은 감기보다 훨씬 기나긴 지속적인 기침, 열이나며 체중감소, 두통, 식욕부진, 잠잘 때 식은 땀, 기침, 화농성 객담이 나오며 심한 경우 객혈을 하며, 가슴 통증이 있으며 얼굴이 창백해 진다.

 결핵균은 균체에 대단히 많은 지질을 가지고 있으며 균체의 25~40%를 점유한다. 주로 세포벽에 있다. [Ziehl-Neelsen염색의 원리가 이거때문이죠!!] 결핵균의 소수성, 저항성을 규정하는 mycolic acid, 생쥐에 대한 치사활성이 있는 지질 cord factor 등이 있다. 균체 내의 단백질에는 tuberculin 반응을 일으키는 활성을 지니고 있다.

 균체 외독소는 생성하지 않는다. 비타민 B 등을 합성하여 특히 발육에 불가결한 niacin(nicotinic acid)을 합성한다. 그 밖의 항산균도 niacin을 합성하지만 결핵균에 비하여 적다. 이 점을 이용하면 결핵균은 다른 항산균과 감별된다(niacin test)

 결핵균은 산, 알칼리, 알코올에 강한 저항성을 가지고 있다. 건조에 대해서도 배양된 균은 6개월 이상 생존하며, 객담 중에서는 더욱 오래 생존한다. 60℃에서 30분 또는 100℃에서 1~2분 가열해도 생존한다. [독한놈!!!] 5℃에서는 1개월 가까이 생존한다. [그래서 결핵 배양검체는 즉시검사하지 않을 시 냉장보관합니다]  5% 석탄수에서 1분간, 5%의 크레졸액에서 5분간, 순수 알코올에서 5분간 생존하며, 객담 중에서는 더 강하다. 역성 비누는 효력이 약하고 직사광선에서는 20~30분 사멸하며, 자외선을 쬐이면 수분 이내에 사멸한다.

 가늘고 긴 간균이다. 편모, 아포, 협막은 없다. 염색은 항산균 염색으로 Ziehl-Neelsen 염색법과 형광염색법이 있지만 앞전에 AFB염색에서도 언급 했지만 미생물학회에서는 권장하는것은 형광염색법이고 검출률 또한 형광염색이 우수하다. 하지만 대학병원급이 아닌 이상 형광염색법을 시작하기 위한 조건(시설문제, 검사건수, 수지타산 등)들이 중소병원에서 하기에는 여의치 않은 실정이다. 그래서 대학병원급을 제외한 주로 Ziehl-Neelsen을 하고 있는 실정이다. 따라서 Ziehl-Neelsen법으로 염색하면 결핵균은 적색으로 염색된다. 

 결핵균은 호기성이다. 3~5%의 CO2조건에서 발육이 촉진된다. 최적 발육온도는 37~38℃이며, 최적 pH는 6.8~7.3이다. 집락은 4~8주 배양한 후에 육안으로 관찰되며 비교적 다른 균에 비해 발육이 늦다. 고체배지로는 3% Ogawa배지[배양용], 1% Ogawa배지[항생제 감수성용], Lowenstein-Jensen배지, Middlebrook 7H-10배지가 일반적으로 이용된다.( ★★★)

 고체배지에서의 결핵균의 적형적인 집락의 형태는 담황백색이고 표면이 거칠며 건조하다. 집락 주변은 거칠며 부풀어 올라 있다. 1~2주 배양에 발육하거나, 습윤하고 오렌지색을 띤 집락은 결핵균이 아닌 비정형 항산균이다.

 인공배지에서 증식할 때 균체가 분열을 계속하면서도 유리되지 않고 길이로 또는 옆으로 연결되어 있어서 뱀 모양의 끈 같은 모양을 형성하는 경우가 많은데 이 모양을 또한 균삭형성(★★)이라고 한다.

 액체배지는 Kirchner배지, Sauton배지, glycerin broth배지가 있다. ★★★ Tween 80과 소의 혈청 알부민을 첨가한 Dubos 배지에서는 다른 배지 보다도 신속히 발육하며 또 액 내에 균등하게 발육할 수 있다. Glycerin broth나 Sauton 배지는 액표면에 접종했을 때만 발육하며, 시험관배지 바닥에 침전하여 발육하지는 않는다. 액 표면에 건조한 균막을 형성하며 관벽을 따라 발육한다.

 검체로는 객담, 위액, 각종 농, 요, 골수액, 수액 등이 있지만 객담으로 검사하는경우가 가장 많다.

※ 객담 전처리 용액 : 4% NaOH ★★★ (중간 기말 국가고시 단골손님)

    전처리 기능(이유): 잡균의 살균과 혼합에 의해 객담 재료의 성분을 용해하여 균질화하기 위한 것 (점액성 -> 장액성)            ★★★